RNAscope

RNAscope

RNAscope® (新一代RNA原位雜交技術)

RNAscope?專利技術是美國ACD公司開發。RNAscope?是一項用於檢測位於完整細胞中目標RNA的定量原位雜交(in situ hybridization , ISH) 的新技術。該技術以其能放大特異性信號而非噪音信號的專利探針引物設計方法,代表了RNA原位雜交(ISH)領域一項重大進步。

  • RNAscope® 探針引物設計與信號放大原理

為了能夠顯著提高RNA原位雜交ISH的信號噪聲比,RNAscope?采用了一項原理已被證實的十分類似於熒光共振能量轉移(FRET)的設計原理。兩個獨立的引物探針 (Z形引物對) 需要隨機與目標序列互補結合,以實現信號放大。因為兩個獨立引物相互緊挨同時相互互補結合到一個非目標序列的可能性非常之小,這種設計原理保障了對目標信號的特異性放大。

對於任意一個目標RNA序列,都有一組獨特設計的20對Z形引物探針對隻針對該目標序列具有互補雜交特異性,而不會結合到非目標片段上。

  • RNAscope®引物探針設計與信號放大係統的優勢

  • 靈敏度:每三對Z形引物對足以實現對於單一RNA分子的檢測。在部分RNA段落不能被有效抵達或者RNA部分降解等情況下,20對Z形引物對的設計保障了足夠強勁的RNA檢測。
  • 特異性:Z形引物對的設計屏蔽了背景噪音。單一的Z形引物探針對於非目標序列的結合不能夠提供信號放大前體序列結合所需要的足夠長度,以此防止了對於非特異信號的擴增,保障了特異性。
  • 單分子量級的可視性與定量分析: 此20x20x20x的引物設計與信號放大原理讓單一RNA分子能夠在標準的顯微鏡下以一個點狀信號的方式可視化呈現。
  • 能夠檢測到降解了的RNA: 得益於其相對短小的目標結合區域(Z形引物對底端40到50個堿基的長度),此Z形引物對的設計為檢測到部分降解的RNA提供了保障。
  • RNAscope®技術的應用

  • 藥物開發和研究應用
    靶點選擇和驗證
    疾病模型
    臨床前安全性評價
    藥效學研究
    RNA生物標誌物開發和伴隨診斷研究
  • 腫瘤研究的應用
    腫瘤異質性
    腫瘤微環境(TME)
    腫瘤幹細胞
    腫瘤標記物
    癌基因融合
  • 幹細胞研究
    幹細胞識別和特性分析
    幹細胞功能
    幹細胞信號
    幹細胞與疾病
  • 神經生物學研究
  • 細胞生物學研究
  • 傳染病研究
  • 免疫學研究

實驗方案可在6.5至8小時內完成,時間長短取決於不同的RNAscope?實驗方法。手工染色步驟隻需要2至2.5小時的操作時間,更快速的完成檢測實驗。